간염은 많은 원인이있는 심각한 질병입니다. 그것의 발달의 기초는 간에 직접 또는 간접적 인 손상이다. 전체 유기체에 대한 중요성을 고려할 때, 병리학이 얼마나 어려운지 추측 할 수 있습니다. 이 기사에서는 과정의 특징과 실험실에서의 C 형 간염 진단에 대해 자세히 설명합니다.
질병의 원인은 RNA 함유 병원체를 지칭하는 바이러스 약제입니다. 그것은 특징을 가지고 있습니다 - 돌연변이, 즉 구조를 바꿀 수있는 능력. 이로 인해 감염은 면역 체계의 공격으로부터 벗어나 대부분의 경우 간에서의 만성 염증을 유발합니다.
바이러스의 다른 아형의 존재를 감안할 때, 마약의 선택은 genotyping의 결과를 기반으로해야합니다. 질병 및 HCV 구조의 특징에 대한 오랜 연구에도 불구하고 아직이 질병에 대한 특정 백신 개발이 가능하지 않았습니다.
조기 진단의 어려움은 간염의 무증상 과정에 있으며, 결과적으로 사람은 간경변의 단계에서 의사를 방문합니다. 질병을 제 시간에 발견하기 위해서는 정기적 인 건강 검진이 필요합니다. 혈액 검사만으로는 HCV를 검출하고 주변 사람의 감염을 예방할 수 있습니다. 사실 감염자가 오랫동안 병리학을 추측하지 못하고 건강한 사람들에게 바이러스를 계속 전염시킬 수 있습니다.
전송 방법
대부분의 경우 바이러스는 병원체의 농도가 가장 높기 때문에 혈액을 통해 퍼집니다. 따라서 감염이 전송됩니다.
- 혈액 투석과;
- 감염된 바늘로;
- 싸우는 과정에서, 피부가 상처를 입을 때, 그리고 혈액 접촉이 일어날 때;
- 수혈 (수혈).
친밀감 동안의 감염 가능성은 중요하지 않습니다. 왜냐하면 정액과 질 분비물에 병원체가 적기 때문입니다. 감염의 위험은 생식기의 점막의 완전성을 위반하여 상당히 증가합니다. 이것은 공격적이며 항문 섹스에서 관찰됩니다.
수직적 인 전달 방식은 노동 과정에서 수행된다. 태아의 임신 기간에는 병원체가 태반을 통해 배아에 침투 할 수 없습니다. 자연 분만 중에 병원성 물질은 피부가 손상되었을 때, 어머니의 혈액과의 접촉이 관찰 될 때 아이에게 전염됩니다.
병원균이 건강한 유기체에 침투 한 후, 항체의 합성이 시작됩니다. 이는 감염으로부터 보호되며 면역 구조에 속합니다. 그들은 ELISA를 사용하는 사람의 초기 연구에서 발견됩니다.
진단을 확인하기 위해 환자는 중합 효소 연쇄 반응을 받게됩니다. 그것은 병원성 인자의 유전 물질과 바이러스 부하의 결정에 대한 분석입니다.
C 형 간염의 검사실 진단
실험실 진단은 효소 면역 측정법으로 시작됩니다. 그것의 주된 임무는 병원체에 대해 생산 된 항체를 검출하는 것이다. 효율은 거의 95 %입니다. 이 연구 덕분에 전임상 단계에서 바이러스 운반체를 확인하고 추가 검사를 위해 보낼 수 있습니다.
ELISA의 정성 분석은 환자의 혈액에서 면역 글로불린의 존재 또는 부재를 나타냅니다. 그 결과는 "긍정적"또는 "부정적"일 수 있습니다. 첫 번째 답변을받은 사람은 다음 검사 인 PCR에 보내집니다. 가격은 시약 및 실험실의 품질에 따라 다릅니다. 폴리 메라 이제 연쇄 반응의 비용은 4 천 루블에 이른다.
PCR 특징
폴리 메라 이제 연쇄 반응을 사용하여 생물학적 물질이 소량이라도 혈액 내의 바이러스 부하를 추정 할 수 있습니다. 즉, 1 밀리리터의 유체에서 병원균의 농도를 계산할 수 있습니다.
PCR의 출현으로 간염 진단이 훨씬 쉬워졌습니다. 이 분석을 통해 HCV RNA를 확인하고 감염 과정의 단계와 바이러스 매개체의 감염성을 확립 할 수 있습니다.
유전 진단에는 여러 가지 유형이 있습니다.
- C 형 간염에 대한 PCR의 정성 분석 - 피험자의 혈액에서 HCV의 존재 유무를 확인합니다 :
- 양적, 당신은 바이러스의 농도를 계산하고 질병의 단계를 설정할 수 있습니다. 결과는 IU / ml 또는 copies / ml로 제공됩니다 (실험실에 따라 다름).
- 유전자형 - HCV의 유전자형을 결정하는 데 필요합니다. 이 경우 가장 효과적인 약물 선택을 위해 필요합니다. 간접적으로 간에서의 병리학 적 과정의 심각도를 분석하여 분석합니다. 따라서 병원체의 세 번째 유전자형에서 지방증이 가장 많이 관찰되며, 그 중 기초가 간세포 (세포)에 지방이 축적되어있다. 또한, 바이러스 유형은 치료 과정의 결과 및 기간에 영향을 미칩니다.
C 형 간염 PCR의 정성 분석
우선, 생물학적 물질은 HCV RNA의 존재에 대해 실험실에서 조사됩니다. C 형 간염의 정성 분석에는 일정 수준의 민감도가 있으므로 항상 올바른 대답을 줄지는 못합니다. 이 경우 다른 시약을 사용하여 검사실 진단을 다시 수행하는 것이 좋습니다.
신뢰할 수있는 결과를 얻으려면 감도가 50 IU / ml 이상인 테스트 시스템을 사용해야합니다.
진단 결과는 "양수"또는 "음수"일 수 있습니다. 병원균이 혈액에서 발견되지 않으면 연구가 완료됩니다. 병원성 인자가 표본에서 검출되면, 바이러스 성 부하가 정량화됩니다.
가짜 음성 반응은 과정을 위반할 때, 예를 들어, 병원체의 복제 구성을 억제하는 활성 성분이 배지에 들어갈 때 얻어진다. 따라서 진정한 혈액 사진을 표시 할 수 없으므로 사람의 감염이 진단되지 않습니다.
생물학적 물질을 수집하기위한 튜브 및 연구 환경이 오염되었을 경우 위양성 결과를 얻을 수 있습니다. 또한 간장이 여러 바이러스 (예 : C 형 간염 및 D 형 간염)에 의해 영향을받는 혼합 감염의 경우에도 이러한 분석 반응이 가능합니다.
질적 연구를위한 적응증
의사는 환자에게 C 형 간염 바이러스의 RNA 확인에 대한 질적 연구를 처방 할 수 있습니다.
- 양성 또는 모호한 효소 면역 분석 반응을받은 경우;
- 진단의 검증을 위해;
- 바이러스 부하를 결정한다.
- 질병의 단계를 설정;
- 혼합 감염의 진단. C 형 간염은 종종 "D"바이러스와 동시에 간을 감염시킵니다.
- 원인 인자의 유전자형을 고려한 치료 전술 결정;
- 항 바이러스제로 치료하는 동안 변화의 동력을 평가합니다.
폴리 메라 이제 연쇄 반응의 장점은 다음과 같습니다 :
- 전임상 단계에서 감염 사실을 입증 할 수있는 기술의 높은 민감도;
- 병원균의 유전 물질 확인 및 그 항체가 아닌;
- 병원성 인자의 아형을 확립 할 수있는 가능성;
- 영양 배지에 물질을 뿌릴 필요가 없으므로 높은 진단 률을 유지해야하며 특정 검사 시스템을 사용하는 것으로 충분합니다. 5 시간 후에 결과를 얻습니다.
- 다양성. 분석을 통해 모든 유전 물질 (RNA, DNA)을 확인할 수 있습니다. 덕분에 의사는 C 형 간염 및 다른 유형의 질병을 확인할 수 있습니다 (B).
- 잠재적 인 감염을 감지하는 능력.
양적 연구
폴리 메라 이제 연쇄 반응을 이용한 혈액 연구에서 고정 된 부피의 생물학적 물질에서 병원균의 수를 계산할 수 있습니다. 지표는 IU / ml로 표시됩니다. 분석을 통해 환자의 전염 정도를 결정하고 감염 과정의 단계를 결정하며 약물 치료의 효과를 평가할 수 있습니다.
PCR을 기초로 전문가는 어느 약품이 병원균의 번식을 막을 수 있는지를 결정합니다. 또한 항 바이러스 치료 기간과 삶의 예후를 결정합니다. 시험 시스템이 높은 감도를 가지고 있다는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 따라서이 방법으로 전임상 단계에서 사람의 감염을 확인할 수 있습니다.
유전자형
병원체의 돌연변이 능력을 감안할 때 치료 방법과 항 바이러스제 선택에있어 유전형이 필요합니다. 예를 들어, HCV 1의 치료는 48 주간 지속되며 긍정적 인 경향은 60 %의 경우에서만 관찰됩니다. 유전자형 2와 3은 더 나은 예후를 가진다. 항 바이러스제는 8 개월 동안 처방되며 그 효과는 85 %에 이릅니다.
통계에 따르면 대부분의 경우 HCV 1, 2 및 3이 러시아 연방에 등록되어 있습니다.
실험실 검사를 해독 할 때이 답변을 표시 할 수 있습니다 ( "입력하지 않음"). 이는 바이러스가 환자의 순환계에서 순환하고 테스트 시스템에서 인식 할 수 없음을 의미합니다. 이 경우의 분석 결과는 특정 지리적 영역에서 병원균이 전형적이지 않다는 것을 나타낸다.
신뢰할 수있는 결과를 얻는 방법?
C 형 간염의 원인균 RNA를 검출하기위한 PCR의 정성 분석이 정확한 결과를 나타 내기 위해서는 실험실 진단을 준비하기위한 요구 사항을 준수해야합니다.
- 혈액 샘플링은 공복시에 실시되며 "배고파"간격은 8 시간보다 짧아서는 안됩니다.
- 연구 2 일 전에 알콜 음료를 마시지 말고 매운 음식, 지방 음식, 훈제 음식을 버리십시오.
- 혈액 응고를 줄이는 약물, 예를 들어 헤파린의 도입을 취소하십시오. 이 약들이 건강 상 이유로 처방되는 경우 의사에게 반드시 알려야합니다. 또한 전문가는 실험실 연구 결과에 영향을 미칠 수있는 다른 약물의 허가를 알고 있어야합니다.
- 생물학적 물질 수집 전날에는 물리 치료 절차를 수행해서는 안되며 심한 육체적 인 노력을해야합니다.
분석 결과는 혈액을 기증 한 사람뿐만 아니라 다른 요인에 의해서도 영향을받을 수 있습니다.
- 저품질 혈액 샘플링;
- 생물 자원의 운송에 관한 권고 불이행;
- 실험실 근로자의 훈련 부족.
- 연구 기법에 대한 비준수;
- 혈액 샘플링 전날에 항응고제 (헤파린) 도입. 이 약물 그룹은 응고를 줄이므로 시약의 작업 속도가 느려집니다.
다른 실험실에서는 진단 반응이 약간 다를 수 있지만 이러한 오류는 연구의 최종 결과에 영향을 미치지 않습니다.
실험실에서 사용되는 테스트 시스템 유형에 특히주의를 기울입니다. 종종 민감도가 높은 시약이 선호됩니다. 이것은 바이러스 성 부하가 낮은 환자에게있어서 발견하기가 어렵 기 때문에 중요합니다.
실험실 테스트는 얼마나 자주 수행됩니까?
일차 중합 효소 연쇄 반응은 간염의 병원균에 대한 항체에 대한 면역 분석으로 검출 된 사람들에서 수행됩니다. 이 경우, 그것은 사람의 감염 사실을 확인하고 질병의 단계를 확립하도록 지정됩니다. 또한 분석을 통해 바이러스의 하위 유형을 결정할 수 있는데, 이는 특히 약물 선택에 중요합니다.
실험실 테스트를위한 다음 기간은 항 바이러스 요법의 시작으로부터 3 개월입니다. 진단을 통해 의약품의 유효성을 평가하고 용량을 조정하거나 교체 할 수 있습니다.
기본 검사 이외에도 치료 시작 4 주 및 24 주에 PCR을 추가로 시행 할 수 있습니다. 이 질병의 양성 예후는 치료 3 개월 후 바이러스 부하 감소로 확인됩니다. 예를 들어, 100 만 IU / ml에서 수십만으로 감소해야합니다.
혈액 내 병원체의 농도가 같은 수준으로 유지되거나 약간 증가하면 항 바이러스제가 효과적이지 못하며 대체가 필요합니다. 치료 끝에 PCR을 사용하여 환자의 회복을 확인할 수 있습니다.
검사실 진단 결과를 올바르게 해석하려면 간호사 또는 전염병 전문의의 진찰이 필요합니다. ELISA에서의 잘못된 반응 빈도가 높을 경우, 분석은 1 차 스크리닝에만 사용됩니다. 환자의보다 철저한 검사를 위해 폴리 메라 이제 연쇄 반응을 사용했습니다.
C 형 간염 바이러스에 대한 PCR의 프로 분석
C 형 간염은 모든 사람에게 심각한 간 질환입니다. 병리학은 RNA 분자가 존재하는 구조에서 플라 비 바이러스 HCV에 의해 야기되며 바이러스의 일반적인 유전 암호를 지니고 있습니다.
병리학은 다른 형태 일 수 있으며, 모든 것은 사람의 일반적인 상태와 각 개체의 특성에 직접적으로 의존합니다.
이 구조는 C 형 간염 범주의 바이러스의 신체에 대한 PCR을 분석하는 것을 가능하게합니다.
이를 통해 인체에 위험한 바이러스를 적시에 식별하고 약물 치료 과정을 거치며 건강을 회복하고 간을 파괴하지 못하게 할 수 있습니다.
HCV 바이러스는 급성 - 위험한 형태와 만성적 인 형태로 나타날 수 있습니다. 한 번에 다른 사람이이 바이러스에 감염된 경우 PCR 분석에 할당해야합니다.
왜 PCR 분석이 수행됩니까?
분석 결과에 따라 의사는 치료법을 작성할 수 있습니다
C 형 간염 PCR의 실험실 의학 분석은 플라 비 바이러스를 결정하기 위해 취한 생물학적 물질에 대한 연구입니다. 연구는 중합 효소 연쇄 반응을 나타낸다.
그것은 바이러스 병변의 총 정량적 가치, 그 질적 특성을 보여 주며, RNA를 포함하는 바이러스의 유전자형을 결정하는 것도 가능합니다.
그것은 중요합니다! 이 분석을 토대로 의사가 방법, 치료 유형 및 기간을 결정합니다. 또한 분석을 통해 전반적인 역학 요인, 즉 질병을 다른 사업자에게 전염시킬 수있는 위험 수준을 결정할 수 있습니다.
현대 의학의 분석은 RNA 분석이라고도합니다. 그 이유는 C 형 간염 바이러스에 내재되어있는 RNA는 약 30-60 nm 크기의 RNA 입자로 구성되어 있기 때문입니다. 이 바이러스의 특징 중 하나는 특정 돌연변이 성향입니다.
존재하는 각 아종이나 유전자형에는 다양한 저항성이 있습니다. 이 상황은 질병의 연구 및 치료의 다양한 방법뿐만 아니라 잘 수행 된 치료법을 이용한 추가 예후의 기초가됩니다.
어떻게해야합니까?
분석은 빈속에 엄격히 수행됩니다. 즉, 정맥혈을 아침 식사 전에 제공합니다. 테스트 방법은 Real-Time PCR을 사용하거나 실시간으로 수행되는 현대 표준 진단에 매우 민감합니다.
이 경우의 검출 한계는 15IU / ml이다. 분석은 폐쇄 형 자동화 시스템을 사용하여 엄격하게 수행됩니다. C 형 간염은 COBAS AMPLICOR와 같은 검사를 사용하여 50-100IU / ㎖의 전반적인 감도 수준으로 결정할 수 있습니다.
그것은 중요합니다! 모든 종류의 유사한 현대 연구실 연구는 감도의 특정 임계 값을 고려하여 수행됩니다.
우리는 연구중인 생물학적 물질에서 바이러스를 결정하는 시약의 최소 수준의 능력을 검출하는 데 사용되는 시약의 능력에 대해 이야기하고 있습니다. 신체에 질병이 없다면 연구 결과는 "발견되지 않음"처럼 보일 것입니다.
사진은 PCR 분석 회로를 보여줍니다 :
PCR 분석의 유형 및 그 결과
쿠키 분야에서 가장 경미한 질환과 통증이있는 경우 철저한 연구를 수행 할 의사에게 즉시 문의해야합니다. C 형 간염에 대한 PCR 분석은 다음 3 가지 주요 포인트를 기반으로합니다 :
- 정량 분석.
- 정성 분석.
- 유전자형
수행 된 검사는 병원균의 존재에 대한 다양한 유전 적 계획 증상과 바이러스 혈증의 정확한 특성을 확인하고 식별 할 수있는 기회를 제공합니다. 감도에 직접적으로 비례하여 수행 된 진단 시스템에서 의학 연구는 한 번만 수행 할 수있을뿐만 아니라 일부 확인을 수행 할 수 있습니다.
이것은 이전에 얻은 결과를 명확히하기 위해 수행되어야하며,이 경우 더 민감한 시약으로 사용됩니다.
고품질 PCR
PCR에 대한 정성 분석은 중합 효소 연쇄 반응과 같은 연구의 또 다른 이름입니다. 바이러스 성 미생물의 존재를 결정할 수있는 시험의 표준 민감도로, 지시약은 10-500 IU / ml의 범위에있게됩니다.
질병에 대한 부정적인 분석 결과, 환자의 혈액에서 총 농도 수준이 진단 시스템에 대한 일반적인 감수성 임계 값보다 낮은 수준으로 나타납니다.
품질 PCR 중 "감지되지 않음"응답이 얻어진 경우, 후속 치료를 위해 시약의 총 민감도 임계 값을 알아야합니다. 양성 반응에 관해서는, PCR 분석 도중, 감염 후에 제 4 날에 이미 얻어 질 수있다. 확립 된 플라 비 바이러스에 대한 표준 단백질 분획은 훨씬 나중에 나타날 수 있습니다.
PCR 분석의 일반적인 계획은 다음과 같이 나타낼 수 있습니다 :
정량적 PCR
정량적 PCR은 인체의 바이러스 RNA 농도의 전반적인 수준을 반영하여 생성 된 바이러스 부하의 특수 지표입니다. 이 표시기는 혈액 정맥에서 채취 한 입방 센티미터 당 바이러스 RNA 효소의 양을 나타냅니다.
의학 연구 시스템에서이 연구의 결과는 1 밀리리터 단위로 표시됩니다. 손에 발급 된 인증서의 경우이 표시기는 170 만 개 또는 1.700.000 IU / ml처럼 보일 수 있습니다.
정량적 PCR 분석은 항 바이러스 요법을 시행하기 전에 환자에게 배정됩니다. 두 번째 시간은 치료 12 주째에 실시되므로 C 형 간염 치료 결과를 올바르게 평가할 수 있습니다. 즉, 분석을 통해 다음과 같은 중요한 매개 변수를 결정할 수 있습니다.
- 감염성의 수준, 즉 감염된 사람으로부터 건강한 사람에게 미생물이 전염되는 위험도가 결정됩니다. 플라 비 바이러스 RNA의 농도가 높을수록 성행위에서 중요한 타인의 감염 확률이 높아집니다.
- 효과의 전반적인 수준과 선택한 치료 방법.
- 이것은 항 바이러스 요법의 기간과 예후를 결정할 수있는 이상적인 기회입니다. 일반적으로 하중이 높을수록 치료 기간이 길어집니다.
정량적 PCR은 실험실 검사의 특정 유형과 민감도 임계 값에 달려 있다는 것을 알고 있어야합니다. 확립 된 표준의 최저 한계는 600.000 IU / ml에 미치지 못하는 지표이다.
평균은 600,000에서 700,000 IU / ml 범위입니다. 결과가 800.000IU / ml 이상으로 얻어진 경우, 의사는 즉시 조성물에 존재하는 바이러스가있는 RNA와 같은 물질의 높은 농도를 결정합니다.
그것은 중요합니다! HCV RNA의 농도와 질병의 심각성 사이의 직접적인 관계는이 바이러스가 일반적인 혈액 구성에 존재 함을 나타내며 또한 병리학의 복잡성을 지적합니다. 환자의 바이러스 부하가 충분히 높을 수 있습니다. 또한,이 관계는 세포에 상당히 심각한 손상이 있음을 나타냅니다.
유전자형
자연 상태에서 HCV의 상대적으로 높은 돌연변이 활동으로 인해 수행 된 검사 과정에서 아픈 사람의 혈액에 바이러스 유형이 어떻게 존재 하는지를 결정할 수 있습니다. 현대 의학에서 C 형 간염과 같은 11 가지의 유전자형이 알려져 있으며, 매우 많은 수의 다른 아종이나 아형을 포함합니다.
유형 1,2 및 3은 러시아에서 잘 알려져 있으며 일반적으로 유전형 분석은 수행 된 분석의 매우 중요한 요소입니다. 의사는 선택한 약물에 대한 병리학 적 저항성 또는 저항성의 수준을 이해합니다.
거의 언제나이 분석에 기초하여 미래의 치료가 이루어집니다. 이것은 다음과 같은 치료 규칙이 있기 때문에 중요합니다.
C 형 간염의 정성 분석
2017 년 3 월 8 일 12시 29 분 전문 기사 : Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10,547
폴리 메라 이제 연쇄 반응의 정성 분석 - C 형 간염에 대한 PCR은 인체에서 HCV의 존재 또는 부재를 결정합니다. 실험실 조건에서는 바이러스를 포함하는 RNA 구조가 조사됩니다. 바이러스 C가 검출 된 경우, 간과 한 상태가 중대한 결과를 초래할 수 있으므로 치료 과정을 거쳐야합니다. 높은 품질의 PCR은 회수 후 항체가없는 것을 확인하기 위해 수행됩니다. 선임 검사를 받도록 임명되었습니다. 혈중 원인 물질의 농도가 낮 으면 진단 시스템에 자체 민감도 임계 값이 있기 때문에 PCR (정성 검사)은 아무 것도 탐지하지 못할 수 있습니다. 질병 또는 경미한 형태의 초기 단계의 경우, PCR은 초 민감성 장비에 대한 초음파 진단으로 수행됩니다.
RNA 바이러스 란 무엇입니까?
C 형 간염 바이러스 (또는 C 형 간염 바이러스 RNA)의 RNA라는 용어는 간 질환 그 자체입니다. 바이러스 C는 몸을 관통하여 몸의 건강한 세포에 결합합니다. 시간이 지남에 따라 몸 전체로 퍼지기 만하면 혈액에 들어갈 필요가 있습니다. 결과적으로, 병원균은 간을 관통하고, 세포와 융합하여 열심히 작용합니다. 간세포 (간세포)는 변화를 겪고 영향을 받아 작동하며, 이로부터 그들은 죽습니다. 바이러스 C가 간에서 더 길면 길수록 세포의 수가 더 많이 죽습니다. 시간이 지남에 따라 위험한 질병이 발병하여 악성 퇴행 및 사망으로 이어집니다.
이런 유형의 바이러스로 간의 감염은 외부 적으로 나타나지 않을 수도 있습니다. 수십 년 또는 수십 년 동안, 감염된 사람은 완전히 건강하다고 느끼며, 무작위 검사 만이 병리를 가장 자주 나타냅니다. 간염에 혈액을 기증하면 인간 유전자 (DNA)의 일부인 RNA (리보 핵산) 사슬의 일부가 검사됩니다. 실험실 테스트 결과는 단지 지표 일 뿐이므로자가 치료에는 사용하지 않아야합니다. 정확한 사진과 추가 진단은 의사가 더 잘 결정합니다.
완료되면 : 연구에 대한 징후
HCV의 확인에서, PCR 분석 (폴리 메라 이제 연쇄 반응)이 수행된다. PCR 연구는 RNA 구조에서 원인 인자를 찾는데 도움을주고 효과적인 치료법을 처방합니다. 다음과 같은 경우에 지명됩니다 :
- 간 염증의 징후 탐지;
- 예방을위한 선별 검사;
- 접촉하는 사람들의 검사;
- 혼합 원인 간염 진단 (주요 병원체 결정);
- 만성 형태의 바이러스의 복제 활성 수준을 결정하는 단계;
- 간경화;
- 처방 된 치료의 효과를 판단 할 수 있습니다.
PCR의 정량 분석뿐만 아니라 정량 분석이 있습니다. 정량적 PCR은 바이러스 운반자가있는 RNA의 백분율을 혈액에 표시하고 정성은 바이러스 존재 여부를 나타냅니다. 양성 반응의 긍정적 인 지표 (C 형 간염 RNA의 존재)도 양적 연구가 필요합니다. C 형 간염의 원인 물질이 높은 농도로 전염되는 위험, 즉 다른 사람의 감염과 관련이 있습니다. 낮은 숫자는 더 잘 치료할 수 있습니다. 혈액에서 RNA 바이러스의 양은 질병의 강도와 관련이 없습니다. 치료 과정의 기간과 복잡성을 처방하기 위해 인터페론 치료의 경우에도 PCR 분석이 수행됩니다.
C 형 간염에 대한 고품질 PCR 분석의 특징
C 형 간염에 대한 항체가있는 모든 환자에 대해 폴리 메라 이제 연쇄 반응 지시자를 정성 분석에 할당합니다. 병에 걸렸고 회복 된 환자는 다시 검사해야합니다. B 형 간염에 대한 분석을 한 다음, 양성 결론이 나왔거나 D 형 간염에 대한 분석을하는 것이 좋습니다. 또한 정 성적으로 분석 된 반응은 다른 혈액 검사와 함께 수행해야합니다. 분석 결과 바이러스 확산의 전체 그림이 표시됩니다.
검사 결과에서 C 형 간염에 대한 양성 검사 만 보거나 부정적인 즉 바이러스의 유무를 알 수 있습니다. 출력이 "탐지 됨"이면 바이러스는 계속 활성 상태입니다. "감지되지 않음"이라는 표시는 바이러스가 없거나 바이러스가 적음을 나타냅니다. 이 표시기를 사용하면 진단 시스템의 분석 민감도가 다르며 RNA C 형 간염이 혈액 내에 존재할 수도 있지만 분석에서는 나타나지 않을 수 있음을 명심해야합니다.
특히 민감한 PCR 방법은 C 형 간염을 아주 적은 양으로도 나타냅니다. 표준 PCR 시스템보다 몇 배나 높은 형광 혼성화 연구가 사용됩니다. 이 방법은 다음과 같은 경우에 사용됩니다.
- 의심되는 숨겨진 형태의 C 형 간염;
- PCR 진단은 병원균을 확인하지는 못했지만 항체가 있습니다.
- 회복의 경우;
- 조기 감염을 발견했다.
디코딩 분석
HCV의 PCR 디코딩은 특히 ultrametod 방법으로 진단을 할 때 최종 결정에 영향을 미칩니다. 이 연구의 가장 큰 단점은 시료와 물질에 대한 무균 상태를 엄격하게 준수한다는 것입니다. 약간의 이탈은 부정확 한 분석 결론을 보여 주며, 진단 및 후속 치료를 복잡하게 만듭니다. 간염 RNA의 결정을위한 PCR의 분석은 항상 자신있게 질병의 그림을 보여주지는 못하며 때로는 부정확성이 허용되며 양방향으로 나타납니다.
간염 바이러스를 진단 할 때는 포괄적 인 검사를하는 것이 좋습니다.
지표 규범
연구 결과에서 바이러스 성 C 형 간염에 대한 JgM 항체가없는 것은 중합 효소 연쇄 반응 분석에서 표준으로 간주됩니다. 동시에 혈청 학적 분석의 결과는 바이러스 C에 대한 항체의 존재를 나타내며 이것은 또한 정상 범위 내에 있습니다. 질적 인 정의는 질병의 강도를 나타내지 않으며 단지 C 형 간염의 원인균을 RNA에서만 밝혀냅니다. 이 분석은 치료 후 실제 회복을 확인하기 위해 반복됩니다.
편향
HCV RNA에 대한 JgM 항체가 존재하는 경우 이것은 감염이 진행되고 있음을 나타냅니다. 동시에 질병은 급격히 또는 만성적으로 진행되어 다른 단계에서 나타난다. 항체 수의 감소가 기록되면 분석 결과는 치료 중에 치료 결과가 회복되었음을 나타냅니다. 진단에서 위양성 소견의 극히 드문 경우가 있습니다. 그들은 임신 중에 그리고 다른 전염병이있는 사람들에게서 발견됩니다.
C 형 간염에 대한 PCR 분석
"만성 바이러스 성 C 형 간염 (CVHS)"진단을 위해서는 임상, 실험 및 도구 연구가 포함 된 포괄적 인 검사가 필요합니다. 정확한 진단을위한 진단의 관점에서 중요한 것은 PCR - 중합 효소 연쇄 반응의 방법입니다.
이 분석은 무엇을 보여주고 왜 필요한 것입니까?
이 실험실 방법은 인간의 혈액에서 C 형 간염 바이러스의 RNA를 검출합니다. 바이러스 항체에 대한 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)와 함께 CVHC와 병원체 유전자형의 진단을 위해 PCR이 사용됩니다. 이 연구는 실험실 진단의 가장 새로운 방법 중 하나입니다. CVHS에서의 신뢰성은 97 %를 초과하며 이는 연구에 대한 아주 좋은 지표로 간주됩니다.
CVHS에 대한 세 가지 PCR 혈액 검사가 있습니다 : 질적, 양적 및 바이러스 유전형. 바이러스의 첫 번째 연구 (정성 분석)는 혈액에서이를 검출하므로 진단 용도로만 사용됩니다.
두 번째 (양적) 연구는 신체의 바이러스 부하의 정도를 결정하므로 치료의 효과를 모니터링하는 데 사용됩니다.
세 번째 PCR (genotyping)은 바이러스의 유전자형을 확립하면서 정확한 항 바이러스 치료제를 선정하는 데 매우 중요한 진단을 명확히합니다.
폴리 메라 이제 연쇄 반응 기술의 본질은 생체 물질에서 병원균의 유전 물질을 증식시키는 효소의 사용이다. 그러한 복제 과정에서, 혈액이 담긴 관은 여러 번 가열되고 효소 반응을 가속 시키는데 필요한 온도로 냉각된다. 이러한 조작의 결과로 바이러스 게놈의 양이 여러 번 증가하므로 최소한의 양으로도 검출 할 수 있습니다.
PCR 진단은 다른 실험실 검사보다 많은 장점이 있습니다.
- 고감도 - 97-98 %;
- 분석적 특이성을 보장합니다 (관련 균주가 아니라 정확히 찾고자하는 병원균을 밝힙니다).
- 전도의 속도 (결론을내는 데 2 일 이상 소요됨).
3 종류의 PCR 분석법
ELISA 분석이 HVGS 바이러스에 대한 항체를 검출 한 모든 환자에게 고품질의 PCR 분석이 할당됩니다. 고품질 PCR을 수행 한 후 두 가지 반응 옵션을 얻을 수 있습니다 : "RNA가 검출되었습니다"또는 "RNA는 검출되지 않습니다." 혈액 내 최소 바이러스 양을 검출하기 위해서는 감도가 50 IU / ml 이상인 검사 시스템이 필요합니다. 환자의 혈액에서 바이러스의 농도가 진단 검체가 결정할 수있는 것보다 작 으면 연구 결과가 거짓 음성 일 수 있습니다. 이러한 진단 오류를 방지하려면 PCR 진단을 수행하는 실험실에 매우 민감한 검사 시스템을 제공해야합니다. 예를 들어 실험실 "Invitro"에서 15 IU / ml의 감도를 가진 테스트가 사용됩니다. 검사실 직원은 첫 번째 요청시 환자 및 의사에게 검사 감도에 대한 정보를 제공해야합니다.
PCR의 정량 분석은 혈액의 viralmia, 즉 바이러스 성 병원체의 농도를 결정합니다. 이 연구의 결과는 고품질의 PCR과는 대조적으로 2 x 10 * 6 IU / ml와 같이 숫자로 표시됩니다. 이는 혈액 1 ml 당 200 만 국제 단위를 의미합니다. 일부 실험실에서는 또 다른 지표 인 복사 수 / ml를 사용합니다. 이 두 지표는 쉽게 전환 할 수 있습니다. 1 국제 단위는 RNA 4 사본입니다. 따라서, 2 × 10 * 6IU / ㎖는 1 ㎖ 중의 바이러스 RNA의 8 × 10 * 6 카피, 즉 혈액 1ml 당 8 백만장.
Genotyping은 바이러스의 6 가지 유전형 중 하나의 정의입니다. 임상 사진, 간장 합병증 발생 빈도 및 환자의 미래 생활 예후는 원인 물질의 유전자형에 따라 달라집니다. 바이러스의 유전자형은 진단 단계에서 이미 중요합니다. 약물의 조합과 환자에게 배정되는 치료 과정의 기간은 정확한 결정에 달려 있기 때문입니다.
그러나이 겉보기에 "완벽한"실험실 연구에도 단점이 있습니다.
- 연구 결과를 왜곡시킬 수있는 모든 병원균의 유전 물질을 복제한다. 따라서 PCR을 통해 효능을 모니터링하기 위해 이전의 2 개월 이후에 재조사가 이루어 지므로 죽은 바이러스는 환자를 "떠날"수 있습니다.
- 테스트 시스템을 사용하여 결정되는 바이러스 게놈의 일부는 이론적으로 다른 바이러스 또는 미생물에 존재할 수 있으므로 가양 성 반응의 가능성이 있습니다.
- 바이러스가 빠르게 변이됩니다. 바이러스 변이의 속도와 정도가 너무 높아서 시험 시스템이 게놈 잡기를 멈추는 경우가 있습니다. 결과적으로 잘못된 결과가 발생할 수 있습니다.
이러한 단점을 보완하기 위해 PCR 진단을위한 실험실 테스트 시스템 제조업체는 바이러스의 특정 유전자형에 대한 교차 반응 및 민감성을 포함하여 지속적으로 테스트를 수행합니다.
C 형 간염에 대한 PCR 검사는 어떻게합니까?
PCR 검사의 결론을 신뢰할 수있게하기 위해서는 그 수행을위한 준비 규칙을 엄격히 준수해야합니다.
- 이 연구는 빈속 (포도당, 지방, 식품의 혈액에 들어가는 미네랄, 효소 반응의 속도와 품질에 영향을 미칠 수 있음)에서 수행됩니다.
- 마지막 식사와 분석을위한 혈액 채취 사이의 간격은 적어도 8 시간이어야한다;
- 연구 직전에는 술을 취하고 지방이 많은 음식을 섭취하는 것이 금지되어 있으며, 제거 기간은 길어집니다.
- 실험실에 가기 하루 전에 강한 육체적, 정신적 스트레스를 피해야합니다.
- 혈액 샘플링을 할 때까지 담배를 피우지 않는 것이 좋습니다.
거짓 결론의 출현을 피하기 위해 혐의 환자는 혈액을 채취하기보다 조기에 연구실에 와야합니다. 사람이 호흡을 잡는 데는 15-20 분 정도가 걸립니다. 빠른 산책 후에 혈액에있는 아드레날린은 검사 결과에 영향을 미칠 수 있습니다.
분석을 위해 환자가 약물을 복용했다면 그는 의사에게이를 알려야합니다. 그들 중 일부는 (가능하다면) 얼마 동안 거절 될 수도 있습니다.
C 형 간염에 대한 PCR 분석 결과
분석을 수행 한 실험실 의사의 결과를 디코딩. 디코딩은 표준에서 얻은 결과의 편차를 결정합니다. 지표의 비율은 진단을 위해 실험실에서 사용하는 테스트 시스템 제조업체가 직접 설정합니다. 따라서 일부 실험실에서 바이러스 부하가 IU / ml 및 기타 사본 / ml로 결정된다는 것은 놀라운 일이 아닙니다.
결론을 얻은 후에, 그것을 정확하게 해석 할 수 있어야합니다. 연구 결과의 치료는 C 형 간염 환자의 주치의가 수행해야합니다. 객관적, 도구 적 및 검사실 검사 후 의사는 획득 한 PCR 결과를 올바르게 해석 할 수있는 충분한 양의 데이터를 얻을 수 있습니다.
정성 분석의 평가는 원칙적으로 환자에서도 어려움을 유발하지 않습니다. 결과는 "감지 됨"또는 "감지되지 않음"중 하나 일 수 있습니다. 이 경우 두 번째가 표준입니다.
정량 분석의 지표는 해석하기가 더 어렵습니다. 그것은 환자에게 바이러스 부하의 정도를 보여줍니다. 심지어 간호 학자들 사이에서도, 검출 된 바이러스 혈증을 치료하는 방법에 대한 합의는 이루어지지 않았다. 대부분의 의사들은 8 × 10 * 5 IU / mL 이상의 고부하가 고려되어야한다고 생각합니다. 1 x 10 * 7 IU / ml 이상의 하중은 매우 높고, 낮은 하중은 4 x 10 * 5 IU / ml 이하입니다.
바이러스 부하의 정도는 바이러스의 독성 (공격성)을 나타냅니다. 혈액 속의 양이 클수록 간장 합병증이 더 빨리 진행될 수 있습니다. 임산부의 혈액에서 바이러스의 농도가 높으면 태아에 대한 혈장 - 태반 장벽을 통해 침투 할 가능성이 높아집니다. Viremia는 또한 치료의 효과에 영향을 미칩니다 : 치료 횟수가 적을수록 치료 효과가 높습니다.
C 형 간염에 대한 PCR 분석의 정확성을 확신하기 위해서는 입증 된 실험실에만 선호하는 것이 필요합니다. 이 경우 가격 정책이 주요 역할을해서는 안됩니다.
PCR 진단의 사용
분자 생물학에서 중합 효소 연쇄 반응 (PCR)은 바이러스를 검출하기위한 실험적 방법입니다. 그것은 생물학적 물질의 샘플에서 특정 핵산 조각 (DNA)의 농도를 현저하게 증가시켜이를 확인 (인식)하고 계산할 수있게합니다.
분석은 다음과 같이 수행됩니다. 잠재적으로 원하는 유전자를 포함 할 수있는 유전 물질 (혈액 샘플)이 튜브에 도입됩니다. 또한 원하는 유전자의 작은 길이의 화학적으로 합성 된 부분 인 프라이머가 있습니다.
DNA 또는 RNA 중합 효소는 또한 용기에 첨가되며 원래와 완전히 동일한 핵산 사슬을 정렬 할 수 있습니다. 생성 된 조성물을 주입하고 4 개의 유리 뉴클레오타이드 세트 (RNA 또는 DNA 용 특수 건축 자재 중 하나에는 방사성 인 입자가 들어 있음)가 주입됩니다.
생성 된 혼합물은 95-96 ℃로 가열되어 정상적으로 얽혀있는 두 개의 DNA 나선이 만들어집니다. 그런 다음 약물이 냉각되면서 프라이머 자체가 바이러스 게놈의 원하는 영역에 부착되어 RNA (또는 DNA)가 이중 나선을 재 형성하지 못하게합니다.
냉각 과정에서, 폴리머 라제는 유리 뉴클레오티드 쇄를 찾는다. 이 효소의 기능을 위해서는 뉴클레오티드의 단일 사슬이 필요합니다. 폴리 메라 이제는 DNA 사슬을 따라 밧줄에있는 고리처럼 미끄러 져 있기 때문에 이중 나선을 만들 수 없습니다.
그 후, 반복되는 가열 사이클이 수행되어, 뉴클레오타이드 사슬이 분리된다. 이러한 PCR 사이클의 각각에서, 간염의 원하는 유전자의 샘플에서의 양은 기하 급수적으로 증가하고, 나머지 유전 물질은 선형으로 생성 (성장)한다.
뉴클레오타이드 잔기로부터 용액을 정제하고 분자량 파라미터에 의한 DNA 쇄의 전기 영동에 의한 분리 후, 연구중인 샘플에 원하는 유전자가 존재하는지 여부를 쉽게 결정할 수있다.
PCR의 이점
PCR을 이용한 실험실 테스트는 바이러스 RNA의 존재보다 더 많은 정보를 얻을 수 있습니다. 방사성 방사선 수준의 매개 변수를 결정함으로써 연구 대상 샘플에 얼마나 많은 유전 물질이 원래 포함되어 있는지 확인할 수 있습니다. 간염의 경우 바이러스 부하 수준의 지표를 결정하십시오.
이 방법의 또 다른 이점은 CR 반응의 매우 높은 민감도입니다. 그것은 바이러스를 탐지하는 고전적인 방법보다 훨씬 높습니다. 이상적으로, 원하는 유전자를 확인하기 위해, PCR을 위해, 표본에서 하나의 바이러스만으로 충분합니다.
또한 PCR은 완전히 특이 적입니다. 프라이머는 다른 서열이없는 원하는 유전자의 고유 한 영역과 완전히 일치하도록 설계되었습니다. 독특한 지문처럼 모든 유전자는 독특한 뉴클레오티드 서열을 가지고 있습니다.
PCR의 정성 분석
정성 분석 결과 혈액에서 바이러스의 존재 만 나타납니다. 이 테스트는 혈액에서 C 형 간염 항체가 발견 된 모든 환자에 대해 수행해야하며, "검출 됨"또는 "검출되지 않음"의 두 가지 값 중 하나만을 초래할 수 있습니다. 건강한 사람의 경우 기준 (기준치)은 "감지되지 않음"이어야합니다.
이러한 질적 연구의 결과에 대한 특별한 해석이있다.
- 결과가 "감지되었습니다." 이것은 분석 된 생물학적 물질 샘플에서 C 형 간염 바이러스에 특이적인 RNA 단편이 발견되어 C 형 간염 바이러스에 감염되었음을 의미합니다. 고품질 PCR 결과가 "탐지 됨"이면 바이러스가 증식합니다. 이시기에 체내의 새로운 간세포에 감염됩니다.
- 결과는 "감지되지 않음"입니다. 그러한 평결은이 실험실에서 얻은 생물학적 물질의 분석 된 샘플에서 C 형 간염 바이러스에 특이적인 RNA 조각이 발견되지 않았거나이 샘플에서 병원균 감염 RNA의 농도가 시험의 감도 한계 이하임을 나타냅니다.
C 형 간염 바이러스 RNA의 급성기에는 인체 감염 직후 1-2 주 후에, 즉 간염 자체에 대한 항체가 출현하기 훨씬 전에 PCR 법에 의한 그러한 정성 연구가 이미 검출 될 수 있습니다.
이 연구의 신뢰할 수없는 테스트 결과는 다음과 같이 얻을 수 있습니다.
- 오염 된 생체 재료;
- 환자 혈액에 헤파린이 존재 함.
- PCR의 다양한 구성 요소에 영향을 미치는 화학 물질 또는 단백질 물질 (억제제) 샘플의 존재.
PCR의 정성 분석을 수행하기 위해서는 연구를 위해 환자를 특별하게 준비 할 필요가 없습니다. 사용 된 재료는 정맥혈입니다.
결과 평가
고품질 PCR 검사는 민감도가 일정 수준이며 연구의 정확도 및 실험실 장비 수준에 따라 10 ~ 500 IU / ml까지 다양합니다.
즉, 혈액 샘플의 바이러스가 매우 낮은 농도 (이 실험실의 민감도의 임계 값보다 작음)에 있으면 아픈 환자의 결과가 "감지되지 않을"수 있습니다. 이 때문에 항 바이러스 요법을받는 환자의 경우 예를 들어 낮은 바이러스 농도 (낮은 바이러스 농도)의 PCR을 정성 분석 할 때이 진단 시스템의 민감도 임계 값을 아는 것이 중요합니다.
진단 시스템의 변형
바이러스 반응을 조절하려면 항 바이러스 치료를 시행 할 때 민감도가 50 IU / ml 이상인 진단 시스템을 사용하는 것이 좋습니다. 이러한 기준은 예를 들어 Cobas Ampicolor HCV-Test 분석기 (50 IU / ml까지 정확함)와 RealBest HCV RNA (15 IU / ml의 감도를 가짐)를 충족시킵니다.
WHO의 권고에 따르면 C 형 간염의 확진을 확립하기 위해서는 다른 종류의 간염 마커가없는 환자의 혈청 샘플에서 C 바이러스 RNA의 3 배 검출을 기준으로 만 기반을 세우는 것이 필요합니다.
PCR 방법 외에도 TMA 분석법 (전사 증폭 방법)을 사용하여 환자의 HCV RNA를 검출합니다. 그것은 가장 높은 감도 한계 (5-10 IU / ml)를 가지고 있지만, 우리나라에서는 그러한 시험 방법이 아직 매우 일반적이지 않습니다.
탐지 된 바이러스 수정 범위
혈청에서 C 형 간염 바이러스 RNA의 존재를 확인하는 이러한 정량적 분석을 통해이 바이러스의 여러 유전형을 결정할 수 있습니다. 현재 과학은이 바이러스의 6 개 이상의 유전자형과이 질병의 약 10 가지 아형을 알고 있습니다.
우리 나라에서는 일반적인 바이러스 1, 2, 3 유전자형입니다. 실험실은 아형에 상관없이 1a, 1b, 2a, 2b 및 2c뿐만 아니라 3, 4, 5a 및 6과 같은 유전자형을 검출 할 수 있습니다. 모든 바이러스 수정에 대해 탐지 특이성은 100 %입니다.
PCR 정량 분석
정량적 PCR 테스트를 사용하여 혈액 샘플에서 간염 바이러스의 농도 수준을 결정합니다 (바이러스 부하). 바이러스 농도 (바이러스 농도)에 대한이 검사를 통해 특정 유전 물질 (바이러스 RNA 자체)의 단위 수를 결정할 수 있습니다.이 단위는 특정 양으로 검출됩니다. 이 경우 농도를 1 ml로 결정하십시오. 이는 1 cu에 해당합니다. 참조
분석의 정량적 매개 변수는 수치로 표현되며,이 목적을 위해 IU / ml로 언급되는 밀리리터 (ml) 당 국제 단위 (IU)를 측정 단위로 사용합니다. 일부 실험실에서는 바이러스의 양을 다른 단위로 측정 할 수 있습니다. ml 당 사본 수는 copies / ml로 표시됩니다.
- 날짜 C 형 간염의 경우, 이러한 PCR의 정량 분석은 치료 시작 직전에 이루어집니다. 그리고 1, 4, 12, 24 주에. 12 주 평가는 치료 효과를 판단 할 수있는 지표입니다.
- 분석 준비. PCR의 정량 분석을 수행하기 위해서는 연구를 위해 환자를 특별하게 준비 할 필요가 없습니다. 30 분 이내에 샘플링을하면 안됩니다. 정맥혈은 실험실 재료로 사용됩니다.
결과 평가
다양한 실험실 테스트 시스템 ml의 IU /에서이 지표의 다양한 변환 요소가 있습니다. 평균 인출 파라미터 변환 4 개 카피 / ㎖ = 1 IU / ㎖. 즉, 실험은 PCR 분석의 결과를 출력하는 경우, 예를 들면, 2.4 × 106 카피 / ㎖,이 파라미터는도 4 및 6에 의해 분할해야 * 5 월 10 IU / ㎖를 얻는다.
800,000IU / ml의 하중은 약 3 백만 카피 / ml에 상응하는 것으로 간주된다. 일부 저자들에 따르면, 낮은 바이러스 혈증은 400,000 IU / ml 이하의 정량적 PCR의 매개 변수에 해당한다.
정량적 테스트 결과 최종 결과는 디지털 값의 형태가 아닌 "측정 범위 아래"또는 "감지되지 않음"으로 전달 될 수 있습니다.
- 평가 : "측정 범위 아래" 이것은 정량적 검사가 C 형 간염 바이러스 RNA를 검출하지 못했음을 나타내지 만 바이러스 자체는 매우 낮은 농도로 체내에 존재합니다. 이는 바이러스의 존재 여부를 확인하는 추가 품질 테스트에 의해 입증됩니다.
- 등급 : 감지되지 않았습니다. 이 결과는 표본 RNA 바이러스에서 정량 검사가 발견되지 않음을 나타냅니다.
바이러스 부하 매개 변수는 우선 질병의 전염 정도, 환자의 "전염성"수준을 결정합니다. 환자의 바이러스 농도가 높을수록 다른 사람에게 전달할 확률이 높아집니다. 예를 들어, 아픈 사람과의 성관계 중 또는 수직으로. 이 양적 지표는 또한 환자 치료의 효과를 결정하는 데 도움이됩니다.
CCP의 정량 분석을 실시하는 것은 항 바이러스 치료법의 성공 여부를 평가하고 과정 기간을 계획하는 데 중요합니다. 따라서 치료에 대한 신체의 반응이 빠르고 바이러스 혈증의 정도가 낮 으면 치료 기간이 단축 될 수 있습니다.
정량적 PCR 매개 변수가 서서히 감소하면 항 바이러스 요법을 연장하거나 수정해야합니다. 바이러스 부하 수준이 낮 으면 이것은 치료에 유리한 요소이며 상승하면 사용 된 방법이 효과적이지 않으며 약물이나 약물 사용 방법을 변경해야합니다.
C 형 간염 PCR의 정성 및 정량 분석 : 음성, 양성, 성적표
C 형 간염은 플라 비 바이러스 HCV (영어 C 형 간염 바이러스)에 의해 유발 된 바이러스 간 질환으로 리보 핵산 분자 (RNA)를 포함하고 있습니다. RNA는 바이러스의 유전 암호를 가지고 있습니다. 그것의 존재는 C 형 간염에 대한 PCR 분석을 가능하게합니다.
사람에 대한 HCV의 위험성은 소위 혈청 창 (감염과 면역 체계의 반응 사이의 시간)이 수주에서 6 개월로 상당히 길 수 있다는 사실에 있습니다.
감염을 감지하지 못하고 치료를 시작하지 않습니다.
유기체의 개별적인 특성에 따라, HCV의 운반체는 급성 형태로 나타날 수 있으며, 길고 값 비싼 치료를 요하는 만성 질환으로 발생할 수 있습니다. HCV에 대한 항체의 검출이이 테스트는 모든 사람들에게 이루어집니다 C 형 간염에 대한 PCR을 포함하여 실험실 일련의 테스트를 실시하는 경우, 항 HCV 항체는 자신의 혈액에서 발견되었다.
PCR 분석이란 무엇입니까?
C 형 간염 PCR의 실험실 분석 - 플라 비 바이러스의 존재를 확인하기위한 생물학적 물질 연구.
폴리 메라 이제 연쇄 반응 (약자의 약자로서)은 바이러스가 함유 된 바이러스의 유전자형뿐만 아니라 신체의 바이러스 손상의 정량적 가치, 질적 특성을 보여줍니다.
그들의 기초와 추가 분석에 기초하여, 역학 요법 (다른 운송인에게 전염 될 위험도)뿐만 아니라 치료의 방법과 기간이 결정됩니다.
C 형 간염 RNA 분석이란 무엇입니까?
C 형 간염 PCR은 RNA 분석 (HCV RNA)이라고도합니다. 플라 바이러스는 비리 온 크기가 30-60 nm 인 RNA 입자를 함유하고 있습니다. 이 미생물의 특징 중 하나는 돌연변이에 대한 높은 성향입니다.
바이러스의 아종 (genotypes)은 각각 저항이 다르므로 다양한 치료법과 환자의 예후에 영향을 미칩니다.
생물학적 물질 (정맥혈)은 공복시에 투여되며, 원칙적으로 Real-Time PCR 방법으로 검사합니다 (밀폐 자동화 시스템을 사용하여 15IU / ml의 검출 한계가있는 매우 민감한 실시간 진단).
다른 테스트가 있습니다 (예 : COBAS AMPLICOR). 민감도는 50-100IU / ml입니다. 임의의 실험실 테스트에서, 민감도의 임계 값은 중요하다. 생물학적 물질에서 바이러스의 최소 농도를 검출하는 시약의 능력.
PCR에 의한 C 형 간염 분석의 유형
C 형 간염 PCR은 세 가지 중요한 요소를 포함합니다 :
- 정성 분석;
- 정량 분석;
- genotyping.
이 검사는 병원균의 유전 적 특징뿐만 아니라 바이러스 혈증의 성질을 결정할 수 있습니다. 진단 시스템의 감도에 따라 연구가 한 번 수행되며 결과를 확인하거나 수정하기 위해보다 민감한 시약으로 두 번째 검사가 수행되는 경우가 있습니다.
고품질 PCR C 형 간염
C 형 간염 PCR 분석은 폴리 메라 이제 연쇄 반응의 분석을위한 또 다른 일반적인 이름입니다. 바이러스 병변의 존재를 감지 할 수있는 표준 민감도는 10-500IU / ml입니다.
C 형 간염에 대한 음성 PCR 분석은 환자의 혈액 내 바이러스 농도가 진단 시스템의 감수성 임계 값 이하임을 보여줍니다.
고품질의 PCR이 "not detected"라는 답을 주었다면, 후속 치료를 위해 시약의 민감도의 임계 값을 알아내는 것이 중요합니다.
플라 비 바이러스에 단백질 분획은 매우 나중에 나타난다.
C 형 간염 정량적 PCR
C 형 간염 PCR 양적 측정은 체내의 플라 비 바이러스 RNA 농도를 반영하는 바이러스 부하의 지표입니다. 이것은 혈액 1 입방 센티미터당 얼마나 많은 바이러스 RNA 단편이 들어 있는지를 나타내는 지표입니다. 재래식 시스템의 정량적 테스트에서 C 형 간염 RNA의 PCR 결과는 1 밀리리터 당 국제 단위 (IU / ml)로 표시되며, 다양한 방식으로 기록 할 수 있습니다 (예 : 170 만 개 또는 1.700000 개 IU / ml).
C 형 간염의 정량적 PCR 진단은 HCV 치료 방법의 결과를 평가하기 위해 항 바이러스 요법 시작 전과 치료 12 주에 환자에게 처방됩니다. 바이러스 성 부하는 질병의 세 가지 중요한 지표를 결정할 수 있습니다.
- 감염성, 즉 한 운송 업체에서 다른 운송 업체로 바이러스가 전염 될 위험도 (플라 비 바이러스 RNA 농도가 높을수록 성적 접촉을 통해 다른 사람을 감염시킬 확률이 높음).
- 치료 방법 및 효과;
- 항 바이러스 요법의 기간 및 예후 (바이러스 부하가 높을수록 치료 기간이 길어짐).
C 형 간염의 정량적 PCR 진단은 검사실 검사의 유형과 민감도의 임계 값에 달려 있습니다. 표준의 하한은 600.000 IU / ml까지의 지표로 간주되며, 평균값은 600.000-700.000 IU / ml 이내입니다. 800.000IU / ml 이상인 결과는 높은 수준의 RNA 함유 바이러스로 간주됩니다.
유전자형
자연 상태에서 HCV의 높은 돌연변이 활동으로 인하여 시험 할 때 어떤 바이러스 유전자형이 환자의 혈액에 있는지 확인하는 것이 중요합니다. 총 C 형 간염 바이러스 11 종이 많은 아종 (아형)을 포함하는 행성에 기록되었습니다. 러시아 연방의 영역에서 1,2 및 3을 배포했습니다.
C 형 간염 PCR RNA는 genotyping과 함께 분석의 매우 중요한 구성 요소입니다. 의사는 바이러스의 내성 (내성)을 결정하고, 적절한 약물을 선택하고, 치료 과정을 처방 할 수 있습니다.
Genotyping은 또한 간 상태의 간접적 인 결정을 허용합니다. 예를 들어, HCV의 3 가지 유전자형은 종종 기관지 세포에 지방이 축적되는 지방증을 동반합니다.
C 형 간염에 대한 PCR 검사는 유전형을 결정하는 수치를 산출해야합니다. 실험실 응답은 "입력되지 않은"이라고 말할 수 있습니다. 이는 테스트 시스템에서 발견되지 않은 사람의 혈액 속에 바이러스가 있음을 의미합니다. 이것은 유전자형이 주어진 지리적 영역에서 전형적이지 않다는 것을 나타낼 수 있습니다. 이 경우 분석 시스템의 민감도를 높여 분석을 반복해야합니다.
C 형 간염에 대한 PCR 분석의 해석
C 형 간염 PCR 양성 암호 해독 테스트는 위의 데이터를 기반으로 할 수 있습니다. 실험실 테스트의 결과를 얻을 때 다음 데이터가 일반적으로 작성됩니다.
- "발견됨"/ "발견되지 않음"(C 형 간염의 경우 고품질 PCR);
- RNA 함유 분획의 수, 예를 들어 831.680 ME / ml (정량적 PCR 분석);
- HCV의 유전자형을 결정하는 수치, 예를 들면 - 1, 2, 3, 4;
- 테스트의 이름은 가장 자주 실시간입니다.
C 형 간염에 대한 PCR 분석을 해독 할 때 가장 중요한 것은 바이러스로드를 보여주는 두 번째 항목으로 예후, 방법 및 치료 기간을 결정합니다.
C 형 간염 PCR 검사가 음성이고 ELISA가 양성이면 - 이것은 무엇을 의미합니까?
검사실 검사를 해독하려면 진단 시스템 유형 및 민감도 임계 값에 따라 얻은 정보를 설명 할 hepatologist 또는 전염병 전문의에게 연락하는 것이 중요합니다. 의료 행위에는 의료 교육없이 사람을 오도 할 수있는 혈액 검사 데이터가 많이 있습니다.
예를 들어, C 형 간염 PCR 검사가 음성이고 ELISA가 양성이면 현재 환자의 혈액에 HCV가 없다는 것을 의미 할 수도 있지만 이전에는 급성 C 형 간염을 앓 았습니다. ELISA (positive enzyme immunoassay) 과거에는 바이러스가 침입 한 후에 생산 된 혈액 속에 항체가 존재합니다. 그러나 현대의 의학 실습에서 ELISA 분석은 불충분 한 신뢰로 간주되며 종종 비정형 결과를 산출하므로 의사는이를 일차 검정으로 사용합니다. 질병을 진단 할 때 전문가는 PCR 검사를 통해 정확하게 안내를받습니다.
유용한 비디오
다음 비디오는 PCR 방법의 본질, 분석의 수행 방법을 매우 자세하고 흥미로운 방식으로 알려줍니다.
결론
C 형 간염 PCR의 분석을 위해 일반적으로 정맥혈이 사용됩니다. 대부분의 경우 생물학적 물질의 이중 섭취가 있습니다 - ELISA의 경우와 PCR 검사의 경우 직접적입니다. 정확한 시험 결과를 얻으려면 생물학적 물질의 실험실 수집을위한 기본 규칙을 준수해야합니다.
- 분석을위한 혈액은 공복시 하루 상반기에 제공됩니다.
- 식사와 혈액 채취 사이에는 최소 8 시간이 걸립니다.
- 테스트 전에 알코올 및 튀김 음식도 배제해야합니다.
- 헌혈 전 날에는 신체 활동을 피하는 것이 필요합니다.
혈액 검사 결과는 보통 다음날 준비가됩니다.